培養皿規格尺寸的計算,在國際上有兩種不同的計算方法:一種方法是按皿蓋計算,理由是在培養時(shí)使用恒溫箱內進(jìn)行培養,它可以計算恒溫箱的體積可存放多少個(gè)培養皿;另一種計算方法是按照培養皿皿底計算,理由是在培養時(shí)可按照培養皿的皿底體積計算使用多少培養基。
使用前經(jīng)過(guò)清潔消毒,培養皿清潔與否對工作影響較大,可影響培養基的酸堿度,若有某些化學(xué)藥品的存在,會(huì )抑制細菌的生長(cháng)。新購的培養皿應先用熱水沖洗,再置于質(zhì)量分數為 1 %或 2 %的鹽酸溶液中浸泡數小時(shí),使游離堿性物質(zhì)除去,再用蒸餾沖洗 2 次。若要培養細菌,再用高壓蒸氣 (一 般 6. 8 × 105Pa 高壓蒸氣),120℃ 的溫下30min滅菌,置室溫中干燥,或用干熱滅菌,就是將培養皿置于烘箱內,溫度控制在 120℃左右的情況下維持 2h,即可殺死細菌的胞芽。經(jīng)過(guò)消毒的培養皿才能接種培養使用。
培養皿通常使用固體培養基制成平板培養 (就是平板皿名稱(chēng)的由來(lái)),平板培養基制作是將已裝好的滅菌瓊脂培養基,用溫水 (無(wú)菌)溶化,取下試管的棉花塞,管口子酒精燈火焰上通過(guò),然后微啟滅菌的培養皿蓋,使試管口能深入為宜,傾入培養基后即可蓋密,再輕輕地搖勻傾入的培養基,使之均勻地分布于皿底上凝結,即得平板培養基。由于細菌的繁殖、發(fā)育生長(cháng)是與所供給的培養基 (營(yíng)養)有直接關(guān)系,尤其是作定量檢驗分析,對提供營(yíng)養物的多少,有決定意義。
細菌培養時(shí)對營(yíng)養物提供的多少、是否均勻,培養皿皿底是否平整極為重要,如培養皿皿底不平,瓊脂的培養基分布將隨培養皿皿底是否平整而有厚有薄,薄的部分營(yíng)養供給就不足,這對定量分析有著(zhù)密切關(guān)系,故對定量培養皿皿底要求特別平整的原因所在。但作一般定性 (檢驗細菌、菌落生長(cháng)、繁殖等),使用普通
培養皿即可。